Análisis de genomas de las especies del género Alcaligenes han permitido demostrar un vínculo causal directo entre el gen que codifica una amidohidrolasa de N-acil-L-aminoácido de A. faecalis y la capacidad de hidrolizar OTA
El potencial para degradar la ocratoxina A (OTA), una micotoxina altamente peligrosa, frecuentemente presente en alimentos, se ha analizado en cultivos de cepas del género Alcaligenes. Los análisis de las secuencias de los genomas de diferentes especies de Alcaligenes nos han permitido demostrar un vínculo causal directo entre el gen que codifica una amidohidrolasa de A. faecalis (AfOTH) y la actividad hidrolítica de OTA de esta bacteria. Vemos que el gen que codifica AfOTH está presente en dos especies incluidas en el género Alcaligenes, a saber, A. pakistanensis y A. aquatilis, que también degradan OTA. Sorprendentemente, A. faecalis subsp. faecalis DSM 30030T pudo transformar OTα, el producto de la hidrólisis de OTA. AfOTH de A. faecalis subsp. phenolicus DSM 16503T se produjo en E. coli y se caracterizó enzimáticamente. AfOTH es una metaloenzima que contiene Zn2+ que posee características estructurales y residuos conservados identificados en la familia de enzimas M20D. AfOTH es un tetrámero en solución que muestra actividades tanto aminoacilasa como carboxipeptidasa. Utilizando diversos sustratos potenciales, a saber, N-acetil-L-aminoácidos y carbobenciloxi-L-aminoácidos, demostramos que la enzima muestra una marcada preferencia por Phe y Tyr en el extremo C-terminal. La base estructural de esta especificidad se ha determinado mediante análisis in silico de acoplamiento molecular. La marcada especificidad de AfOTH hacia Phe y Tyr es consistente con su actividad hidrolítica sobre OTA
Ana Sánchez-Arroyo, Laura Plaza-Vinuesa, Blanca de las Rivas, José Miguel Mancheño*, and Rosario Muñoz*. Structural and functional analysis of the key enzyme responsible for the degradation of ochratoxin A in the Alcaligenes genus. Int. J. Biol. Macromol. (2024). https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2024.131342
